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新生SD大鼠大腦皮層神經(jīng)元原代分離培養方法

一.實(shí)驗方法1.多聚賴(lài)氨酸（Poly-D-Lysine）包被培養板的制備：原代分離進(jìn)行前一天，用PBS緩沖液配制終濃度為0.1mg/ml的多聚賴(lài)氨酸工作液，0.22μm濾膜過(guò)濾除菌，于超凈工作臺內吸取1ml加入六孔板內，確保覆蓋板底，靜置孵育30min后吸出（可回收反復使用2-3次），用無(wú)菌水清洗培養板，置于超凈臺內晾干，照紫外過(guò)夜。2.次日，取出生24h以?xún)鹊腟D大鼠，75%乙醇浸泡消毒5min。3.棉球吸干乳鼠體表的乙醇，迅速斷頭，浸泡于冰冷的含有2%雙抗的PBS緩沖液中...

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原代細胞分離培養都有哪幾種方法？

研究中常用的細胞系/株系是現成的，我們只需要進(jìn)行細胞傳代和種子保存。然而，這些細胞系往往因長(cháng)期體外培養而失去原有的生物學(xué)特性，對藥物治療的反應差距越來(lái)越大。因此，越來(lái)越多的人選擇原代細胞。來(lái)源于胚胎、組織、器官和外周血，經(jīng)特殊分離方法制備的原代培養細胞稱(chēng)為原代細胞。原代細胞培養，也稱(chēng)為原代培養，是從供體獲得的組織細胞在體外的培養。原代細胞是接近和最能反映體內生長(cháng)特性的細胞，適用于藥敏試驗、細胞分化等實(shí)驗研究。原代細胞分離培養都有哪幾種方法？1、組織培養法組織培養是一種常見(jiàn)、簡(jiǎn)...

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充質(zhì)干細胞涉及的研究竟然這么多

充質(zhì)干細胞是人體內一類(lèi)具有自我更新和多向分化潛能的原始細胞群。根據遺傳來(lái)源的分類(lèi)，干細胞可分為胚胎干細胞和成體干細胞。其中，胚胎干細胞具有發(fā)育全能性，是干細胞研究和應用中具吸引力的一種。然而，關(guān)于胚胎干細胞的研究一直存在倫理爭議。與胚胎干細胞相比，成體干細胞具有獲取方便、致瘤風(fēng)險低、無(wú)倫理爭議等優(yōu)點(diǎn)。因此，成體干細胞已成為干細胞臨床應用研究的主要對象。在成體干細胞的許多臨床研究中，充質(zhì)干細胞是最多的。間充質(zhì)干細胞是一種來(lái)源于中胚層的成體干細胞，具有自我更新和多向分化的潛能。間...

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原代細胞分離培養有哪些注意事項？

原代細胞分離培養有哪些注意事項？1、組織塊培養法（1）接種后的前3天，觀(guān)察和移動(dòng)時(shí)注意不要引起液體振蕩。避免頻繁的翻倒和振動(dòng)，否則組織塊不易附著(zhù)在瓶壁上或附著(zhù)后脫落飄浮。（2）加入的培養基不宜過(guò)多，以免浸泡的組織因輕微波動(dòng)而脫落。（3）細胞向外遷移時(shí)，注意記錄并清除漂浮的組織塊和殘留細胞。它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會(huì )影響原代細胞的生長(cháng)。（4）為促進(jìn)組織塊盡快貼在培養瓶上，可在種植前在培養瓶底壁涂上一層薄薄的膠原蛋白。2、貼壁原代細胞（1）原代細胞分離培養的分離細胞一次接觸體外環(huán)境時(shí)，...

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充質(zhì)干細胞的醫療價(jià)值真的很高

充質(zhì)干細胞是一種早期未分化細胞，具有自我更新、自我復制、無(wú)限增殖和多向分化潛能等特點(diǎn)。它們可以分泌細胞因子，減輕炎癥，減少組織細胞凋亡，促進(jìn)內源性組織器官干祖細胞的增殖，進(jìn)行免疫調節，從而達到作為種子細胞修復組織器官的效果。經(jīng)過(guò)連續傳代和冷凍保存后，仍具有多向分化潛能，被醫學(xué)界稱(chēng)為“萬(wàn)能細胞”。隨著(zhù)研究的深入，發(fā)現充質(zhì)干細胞實(shí)際上是一組具有高自我更新能力和不同分裂增殖能力的多能干細胞。它們可以在體外培養和擴增，也可以在特定條件下分化成神經(jīng)細胞、成骨細胞、軟骨細胞、肌肉細胞、脂...

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腸道腫瘤類(lèi)器官的研究與應用

ONCOGENESIS|腸道腫瘤類(lèi)器官的應用研究類(lèi)器官（Organoids）類(lèi)器官是一項創(chuàng )新性較高的研究技術(shù)，近幾年來(lái)受到科研人士的追捧和廣泛好評。目前，我們國家在政策層面也給予了大力地支持。2021年科技部發(fā)布的“十四五”國家重點(diǎn)研發(fā)計劃“干細胞研究與器官修復”重點(diǎn)專(zhuān)項中也特別提到疾病類(lèi)器官模型。什么是類(lèi)器官（Organoids）？類(lèi)器官屬于三維（3D）細胞培養物，包含其代表器官的一些關(guān)鍵特性。類(lèi)體外培養系統包括一個(gè)自我更新干細胞群，可分化為多個(gè)器官特異性的細胞類(lèi)型，與對應...

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細胞污染的辨別

細胞污染的辨別細胞污染有很多種不同的類(lèi)型，不同情況的細胞污染其表現也不同，檢測方法也有所不同。不過(guò)大部分的細胞污染，用肉眼加鏡檢就可以解決啦！細胞污染一般分細菌污染，真菌污染，支原體污染，黑膠蟲(chóng)等。1.細菌污染pH升高，培養基變黃，培養基嚴重渾濁，鏡下可見(jiàn)細菌游動(dòng)。2.真菌污染培養液短期內多不渾濁，有肉眼可見(jiàn)漂浮物，鏡下細胞間有菌絲體，生長(cháng)變慢，時(shí)間長(cháng)細胞死亡。3.支原體污染支原體污染后，細胞生長(cháng)一般無(wú)可見(jiàn)變化，在光學(xué)顯微鏡下不可見(jiàn)，極易被忽視，往往直到污染非常嚴重時(shí)才能發(fā)現...

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細胞培養過(guò)程中出現支原體污染，該怎么辦？

細胞培養過(guò)程中出現支原體污染，該怎么辦？加油新學(xué)期謹記：對抗污染，預防大于一切！在細胞培養過(guò)程中，很多小伙伴兒一直受到支原體污染的困擾，我自己養的細胞曾經(jīng)也遇到過(guò)支原體污染，深受其害呀！針對于支原體污染來(lái)說(shuō)，大家一定注意預防！如果已經(jīng)發(fā)現了一絲絲污染跡象，就要做到早發(fā)現、早挽救！如果細胞能夠救回來(lái)，還是可以繼續實(shí)驗的，不耽誤實(shí)驗進(jìn)度。不過(guò)，確實(shí)也很難*清除??！如果說(shuō)實(shí)在救不回來(lái)，那就再買(mǎi)一株新的細胞吧！最后，要買(mǎi)細胞的同學(xué)和老師，可以電話(huà)或郵箱聯(lián)系我們哦！支原體污染對細胞培養...

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